第一节 病毒性肝炎病原学指标测定

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目前已确定的病毒性肝炎病原体有5种，即甲型肝炎病毒(hepatitis  A  virus，HAV)、乙型肝炎病毒(hepatitis  B  virus，HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis  C  virus，HCV)、丁型肝炎病毒(hepatitis  Dvlrus，HDV)、戊型肝炎病毒(hepatitis  E  virus，HEV)、除HBV为双链DAN病毒外，其余均为单链RNA病毒。

        抗HAV抗体测定(anti-hepatitis  A  virus，anti-HAV）

        HAV属于小RNA病毒科，为嗜肝RNA病毒，在体内主要在肝细胞内进行复制，通过粪一口途径传播，多数学者认为HAV不存在慢性携带状态。

        ELISA法：抗HAV-IgM阴性；抗HAV-IgG阴性或阳性。

        血清中抗HAV-IgM在发病1~2w内出现，3m后滴度下降，6m后则不易测出，抗HAV-IgM阳性已被公认为是早期诊断甲型肝炎的指标。抗HAV-IgG出现较抗HAV-IgM稍晚，可长期或终身存在，抗HAV-IgC阳性表示既往感染，但体内已无HAV，是一种保护性抗体，可用于检测机体或注射甲肝疫苗后是否具有对HAV的免疫力以及流行病学调查。

        1．ELISA法影响因素较多，标本要防止溶血，因红细胞中含有  过氧化物酶，红细胞裂解后造成标本溶血，易造成假阳性。

        2．要注意hook效应，即标本含量过高时，由于抗原一抗体比例不合适，易出现假阴性结果。

        3．抗心律失常药物，如普鲁卡因胺、肼苯达嗪，异烟肼，苯妥英钠，保泰松等药物可引起假阳性。

        4．洗涤次数要适当，防止洗涤不彻底致假阳性或洗涤过多致假阴性，要严格按照试剂盒说明书要求进行操作。

        乙型肝炎病毒(HBV)病原学指标测定

        HBV属于有包膜的嗜肝DNA病毒科，血循环中与HBV有关的颗粒从形态上至少可分为三类：1小球形颗粒并非完整的HBV，而是病毒的外壳（或称包膜），由脂蛋白构成，是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的主要成分，HBsAg由于在肝细胞内参与装配Dane颗粒后过剩，游离于外周血，本身无传染性。2管形颗粒实际为一串聚合的小球形颗粒，直径与小球形颗粒相近，具有HBsAg特性。

        3大球形颗粒即完整的HBv，又称为Dane颗粒，由外壳和核壳组成。核壳内古有环状双股DNA、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)、e抗原(HBeAg)等，是病毒复制的主体。

        HBV主要通过血液途径传播，也可通过母婴等途径传播。一般机体感染HBV后产生3种抗原抗体系统：HBsAg和乙型肝炎表面抗体(抗HBs)、HBeAg和乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、HBcAg和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)。

        乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis  B  virus  surface  antlgen，HBsAg)

        HBsAg存在于HBV的外壳，是一种糖蛋白，为大、小球形颗粒和管状颗粒所共有。HBsAg的抗原性较复杂，采用血清学方法分类古有5种不同的抗原表位，分别为a、d、y、w、r'其中a属于特异性共同抗原决定簇。目前已知有10种亚型，最常见的主要有adr、adw、ayw、ayr等4种，各亚型分布有明显的地区性，我国长江以北  以adr为主，长江以南以adr和adw为主，新疆、西藏、内蒙古等少数民族地区主要为ayw，因此HBsAg亚型对乙型肝炎流行病学调查和预防有一定意义。

        ELISA法：阴性。

        参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

        HBsAg  -般在感染HBV后1~2m内出现于血清中，短时在2w内即能够检出，可维持数周、数月、数年以至长期携带。HBsAg虽然本身不具有传染性，但由于其常与HBV同时存在，因此HB-sAg阳性时常被用作传染性的标志之一。HBsAg阳性见于乙肝潜伏期和急性期、慢迁肝、慢活肝、肝硬化、肝癌、慢性HBsAg携带者等。血清HBsAg仅为HBV感染的标志，不反映有无复制、复制程度、传染性强弱及预后等情况。

        乙型肝炎病毒表面抗体／抗-HBs  (hepatitis  B  virus  surface  antibody．HBsAb)

        抗-HBs是机体针对HBsAg产生的一种保护性抗体，表明对HBV具有一定免疫力。一般情况下，抗-HBs在HBsAg消失后出现，多为IgG，少数患者中有IgM，是疾病恢复的开始，可持续多年，其滴度与特异性保护作用相关。

        ELISA、法：阴性。

        参见抗HAV抗体测定中EUSA法。

        抗HBs阳性见于既往感染HBV现已恢复，且对HBV有一定免疫力，接种乙肝疫苗后，仅出现单项抗-HBs阳性；被动性获得  抗-HBS抗体，如注射特异性Ig或输血等。

        抗-HBs和HBsAg可同时出现在HBV感染恢复期，此时  HBsAg尚未消失，而抗HBs已产生；或是s区基因发生变异，野株  抗-HBs不能将其中和清除；或是抗

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